本期為您推薦寧夏醫(yī)科大學(xué)王強(qiáng)老師研究團(tuán)隊(duì)發(fā)表在知名期刊《飼料研究》上的一篇文章：抗噬菌體L-蘇氨酸工程菌的選育及機(jī)理分析。

文章摘要內(nèi)容如下：

噬菌體是侵染細(xì)菌和放線菌的病毒，具有超顯微、無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)、專性活細(xì)胞寄生等特征。噬菌體污染現(xiàn)象普遍在氨基酸發(fā)酵工業(yè)存在，會(huì)造成發(fā)酵周期延長(zhǎng)、發(fā)酵產(chǎn)量降低、倒罐、經(jīng)濟(jì)損失、浪費(fèi)時(shí)間等問(wèn)題。大腸桿菌YPT在發(fā)酵生產(chǎn)蘇氨酸過(guò)程中，有時(shí)會(huì)感染噬菌體，導(dǎo)致蘇氨酸產(chǎn)酸指標(biāo)嚴(yán)重降低，增加蘇氨酸生產(chǎn)成本。因此，以YPT為出發(fā)菌，擬采用誘變篩選到1株抗噬菌體的突變株。常壓室溫等離子體（ARTP）是一種能夠在大氣壓下產(chǎn)生溫度在25~40 ℃、具有高活性粒子濃度的等離子體流，其富含的活性能量粒子對(duì)細(xì)菌的遺傳物質(zhì)造成損傷，誘發(fā)生物細(xì)胞啟動(dòng)SOS修復(fù)機(jī)制。SOS修復(fù)是一種高容錯(cuò)率修復(fù)過(guò)程，修復(fù)過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生種類豐富的錯(cuò)配位點(diǎn)，最終穩(wěn)定遺傳進(jìn)而形成突變株。

本研究通過(guò)常壓室溫等離子體誘變蘇氨酸生產(chǎn)菌，篩選獲得具有噬菌體抗性的蘇氨酸基因工程菌株。從蘇氨酸發(fā)酵染噬菌體發(fā)酵液中分離得到混合噬菌體（P-1）。以P-1為篩選因子，通過(guò)常壓室溫等離子體誘變蘇氨酸生產(chǎn)菌YPT、抗性初篩、溶原性驗(yàn)證、噬菌體抗性遺傳穩(wěn)定性驗(yàn)證、發(fā)酵罐產(chǎn)酸等驗(yàn)證。結(jié)果顯示：通過(guò)篩選得到1株對(duì)P-1具有穩(wěn)定抗性的蘇氨酸生產(chǎn)菌株，命名為YPT-1。在分子水平上對(duì)突變株YPT-1抗噬菌體的機(jī)制做初步研究。采用CRISPR技術(shù)進(jìn)行敲除驗(yàn)證，證實(shí)fhuA基因的缺失可致使菌株獲得噬菌體抗性。研究表明，經(jīng)過(guò)初步產(chǎn)酸驗(yàn)證，此菌株產(chǎn)酸指標(biāo)與對(duì)照株（誘變出發(fā)菌YPT）相比未下降，且產(chǎn)酸穩(wěn)定，具有較好的工業(yè)化應(yīng)用價(jià)值。